Категории

Методики лабораторной диагностики

Методы диагностики в урологии с противопоказаниями

Лабораторные обследования при различных заболеваниях

  МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ


Лабораторные методы исследования проводятся для определения степени активности воспалительного процесса, выявления системности поражений, а также для оценки эффективности проводимой терапии.
  1. Общеклинические методы.

Клинигеский анализ крови проводится с обязательным подсчетом ретикуло- цитов и тромбоцитов.
Наиболее часто при ревматических заболеваниях отмечается анемия, обусловленная хроническим воспалением. Она характеризуется умеренным снижением количества эритроцитов, содержания железа в сыворотке крови и насыщения трансферрина железом при одновременном повышении общей железосвязывающей способности сыворотки крови, высоким уровнем ферритина и является нормо- или гипохромной, нормо- или микроцитарной. Наиболее часто этот тип анемии имеет место при РА, причем выраженность ее при этом заболевании обычно соответствует тяжести воспаления.
Значительно реже развивается железодефицитная и гемолитическая анемия. Развитие железодефицитной анемии при ревматических заболеваниях чаще связано с желудочно-кишечным кровотечением. Такая анемия может быть также обусловлена проводимой терапией или обильными месячными. Типичными признаками железодефицитной анемии являются гипохромия эритроцитов, микроцитоз, высокая железосвязывающая способность сыворотки крови и низкий уровень сывороточного ферритина. При ревматигеских заболеваниях выявление дефицита железа затруднено, наиболее объективными критериями являются содержание сидеробластов и определение запасов железа в костном мозге.
Гемолитическая анемия характеризуется нормохромией эритроцитов и сопровождается ретикулоцитозом. Гемолиз могут вызывать различные медикаментозные препараты, широко назначаемые ревматологическим больным (например, делагил, плаквенил, сульфасалазин), особенно лицам с наследственным дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы.
Очень редко развивается апластическая анемия, которая может быть индуцирована некоторыми противоревматическими препаратами (цитотоксические иммунодепрессанты, соли золота, D-пеницилламин, нестероидные противовоспалительные препараты).
При ревматических заболеваниях может наблюдаться развитие как лейкопении, так и лейкоцитоза. Развитие лейкопении (количество лейкоцитов менее 4,0 х 109/л) и нейтропении (количество гранулоцитов менее 1,5 х 109/л) особенно характерно для СКВ, синдрома Шегрена, смешанного заболевания соединительной ткани, синдрома Фелти, а также может быть связано с приемом некоторых лекарственных препаратов. Изолированная лимфопения (количество лимфоцитов менее 1,5 х 109/л) часто наблюдается при активной СКВ, а иногда может быть следствием глюкокортикоидной терапии.
Умеренный лейкоцитоз (увеличение количества лейкоцитов более 9,0 х 109/л) может наблюдаться при любых воспалительных ревматических заболеваниях, а также быть следствием лечения глюкокортикостероидами. Необходимо помнить, что лечение глюкокортикостероидами может препятствовать развитию нейтрофильного лейкоцитоза на фоне инфекции и маскировать скрыто протекающий септический процесс.

При некоторых ревматических заболеваниях (РА с системными проявлениями, синдром Шегрена, системная склеродермия, а также саркоидоз) иногда наблюдается эозинофилия (увеличение количества эозинофилов более 0,7 х 109/л). Особенно выраженная эозинофилия (количество эозинофилов более 2,0 х 109/л) наблюдается при диффузном эозинофильном фасците, синдроме Чарга — Стросса.
Увеличение количества тромбоцитов более 400 х 109/л может обнаруживаться при многих воспалительных ревматических заболеваниях. При РА тромбо- цитоз отражает высокую активность заболевания. Тромбоцитоз относится к диагностическим признакам болезни Кавасаки, может наблюдаться при синдроме Шегрена и синдроме Шарпа (смешанном заболевании соединительной ткани). Тромбоцитопения является характерным признаком тромбоцитопениче- ской пурпуры, а также нередко выявляется при СКВ (особенно при антифосфо- липидном синдроме).
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) — достоверный критерий активности и тяжести воспалительного процесса. Оценка его в динамике позволяет судить о развитии болезни и эффективности проводимой терапии. К факторам, способствующим увеличению СОЭ, относятся прежде всего воспалительный процесс, хотя анемия, гиперхолестеринемия и беременность также сопровождаются повышением СОЭ. Снижению СОЭ могут способствовать изменения свойств эритроцитов (серповидная форма, сфероцитоз, акантоцитоз, микроцитоз), а также полицитемия, лейкоцитоз, увеличение концентрации солей желчных кислот, ги- пофибриногенемия, застойная сердечная недостаточность, кахексия. Нормальная величина СОЭ не исключает наличия ревматологической патологии, но нормализация данного показателя на фоне лечения ревматического заболевания считается одним из критериев его ремиссии. Повторные исследования СОЭ имеют важное значение для определения степени активности и эффективности лечения ревматических заболеваний.
Оценку общего анализа моги наиболее рационально проводить в сочетании с исследованием концентрационной и фильтрационной функции почек. При лей- коцитурии важно оценить результаты пробы Нечипоренко, двухстаканной пробы и посева мочи, а в случае протеинурии — суточную потерю белка, определение селективности протеинурии. Появление мочевого синдрома на фоне лечения, например купренилом или препаратами золота, требует отмены препаратов. Протеинурия является частым признаком СКВ, ССД, различных форм системных васкулитов, амилоидоза. Кроме того, она может быть обусловлена интерстициальным нефритом, индуцированным нестероидными противовоспалительными препаратами (НПВП) или поражением клубочков при лечении препаратами золота или D-пеницилламином. Нефротический синдром, проявляющийся протеинурией (более 3,5 г/сут), характерен для люпус-нефрита и амилоидоза.
Иногда в моче больных системными ревматическими заболеваниями обнаруживается белок Бенс-Джонса, который состоит из легких цепей моно- или по- ликлоновых иммуноглобулинов. Наиболее часто белок Бенс-Джонса выявляется при синдроме или болезни Шегрена, системном амилоидозе, а также онкогема- тологических заболеваниях (миеломная болезнь, хронический лимфолейкоз, болезнь тяжелых цепей, макроглобулинемия Вальденстрема).

Эритроцитурия может быть обусловлена многими формами патологии мочевыводящей системы. Наиболее часто микроскопигеская гематурия (как правило, в сочетании с протеинурией) развивается при СКВ (люпус-нефрите), ССД, системных васкулитах. Иногда гематурия является следствием интерстициального нефрита, вызываемого приемом НПВП, результатом воздействия на почки препаратов золота или D-пеницилламина. Появление гематурии на фоне лечения циклофосфамидом может быть обусловлено геморрагическим циститом.
Проведение копрологигеского исследования в сочетании с реакцией Грегерсе- на, поиском гельминтов и проведением бактериологического исследования важно для оценки пищеварительной способности желудочно-кишечного тракта, выявления возможных источников хронической кровопотери и этиологически значимых инфекционных агентов.
  1. Биохимические методы.

Развитие иммунопатологического процесса сопровождается развитием дис- протеинемии за счет увеличения содержания глобулиновых белковых фракций. Гипопротеинемия отмечается при нефротическом синдроме (СКВ), амило- идозе почек и РА с системными проявлениями. Электрофорез белков сыворотки крови выявляет изменения глобулиновых фракций. Повышение содержания а2-глобулинов определяется степенью активности воспалительного процесса, а увелигение у-глобулиповой фракции — преимущественно иммунологическим сдвигом. Значительная гипергаммаглобулинемия наблюдается при СКВ, синдроме Шегрена, РА с висцеральными проявлениями и др.
Активность воспалительного процесса характеризуют показатели фибриногена, серомукоида, сиаловых кислот и С-реактивного белка, отражающие процесс дезорганизации соединительной ткани, а также осадочные пробы (сулемовая и тимоловая пробы).
Исследование С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови рассматривается как чувствительный метод оценки степени острого и хронического воспаления. В норме концентрация СРБ в сыворотке крови очень низкая (менее 0,002 г/л), а при РА и многих воспалительных ревматических заболеваниях она увеличивается до 0,01 г/л и более. При РА величина СРБ рассматривается как один из маркеров активности заболевания. Концентрации СРБ находятся в прямой связи с активностью анкилозирующего спондилоартрита.
Изменения коагулограммы характеризуют нарушения в системе свертывания, а длительность кровотечения позволяет оценить состояние тромбоцитарно- го гемостаза и сосудистого компонента.
Повышение уровня креатинина и мочевины в крови больных свидетельствует о развитии почечной недостаточности на фоне вторичного гломерулонеф- рита и амилоидоза почек. При этом важно проводить исследование содержания в крови и моче калия, натрия, хлора, а в крови — кальция, фосфора, (3-липопро- теидов, холестерина и триглицеридов.
Для оценки выраженности некроза скелетных мышц используется определение концентрации ферментов, присутствующих в мышечной ткани. К ним относятся креатинфосфокиназа (КФК), альдолаза и аминотрансферазы. Наиболее чувствительным показателем является КФК. Наименьшей чувствительностью и специфичностью обладает определение аминотрансфераз. Следует иметь в виду, что у некоторых больных активным полимиозитом КФК может быть в пределах нормы (у женщин 167-1317 нмоль/л; у мужчин 283-2467 нмоль/л),
что связывают с присутствием в сыворотке крови специфического ингибитора этого фермента. Выявление повышенного уровня КФК имеет большое значение для ранней диагностики полимиозита и контроля над результатами лечения при этом заболевании.
Увеличение уровня щелочной фосфатазы (норма 217-650 нмоль/л) наблюдается при заболеваниях печени, сопровождающихся холестазом, а также при болезнях костей, характеризующихся избыточной активностью остеобластов, таких как болезнь Педжета, остеомаляция, остеосаркома, метастатическое поражение при злокачественных опухолях различной локализации.
Небольшое увеличение уровня аминотрансфераз иногда наблюдается при СКВ, ревматической полимиалгии и гигантоклеточном артериите и очень редко — в случае других ревматических заболеваний. Устойчивое значительное увеличение уровня аминотрансфераз может свидетельствовать о наличии хронического активного гепатита или первичного билиарного цирроза печени, при которых нередко наблюдаются «ревматические» проявления. Повышение уровня печеночных ферментов у больных с полиартралгиями может свидетельствовать в пользу острого вирусного гепатита. Увеличение уровня печеночных ферментов может быть также обусловлено токсическим воздействием на печень лекарственных препаратов (НПВП, метотрексата и др.).
Соотношение концентрации кальция и фосфора в сыворотке крови позволяет судить о структурных изменениях в костной ткани. Гиперурикемия диагностически важна при подозрении на наличие у больного подагрического артрита.
Функциональное состояние щитовидной железы оценивается по уровню Т3, Т4, ТТГ и уровню антител к ткани щитовидной железы. Аутоиммунный ти- реоидит Хасимото достаточно часто встречается при аутоиммунных ревматических заболеваниях, в частности при РА.
  1. Иммунологические методы исследования имеют важное диагностическое и прогностическое значение при многих ревматических заболеваниях.

Изучение неспецифического иммунитета включает в себя исследование количества лейкоцитов и моноцитов в сыворотке крови, компонентов комплемента, оценку подвижности, фагоцитарной и микробицидной активности мононук- леарных фагоцитов, выработку ими провоспалительных цитокинов (ИЛ-1(5, ИЛ-6, ФНО-а и др.).
Увеличение уровня комплемента наблюдается при остром воспалении, инфекционных процессах, а уменьшение — при иммунокомплексных заболеваниях. Так, уменьшение концентрации С2- и С3-компонентов комплемента в реакции преципитации с антисыворотками характерно для СКВ, РА, анкилозирующего спондилоартрита. васкулитов, неспецифического язвенного колита. Это связано с активацией системы комплемента вследствие образования иммунных комплексов. Диагностически значимо определение компонентов кохмплемента в синовиальной жидкости (содержание снижается при РА), в спинномозговой жидкости (содержание снижается при волчаночном цереброваскулите), в биоптатах кожи и почек.
Состояние клеточного иммунитета оценивается количественными показателями (абсолютное и процентное содержание Т-лимфоцитов, активных Т-лим- фоцитов, Т-хелперов I и II типа) и функциональными тестами. Наиболее часто используют:
  • реакцию торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) в присутствии антигенов и митогенов: РТМЛ с фитогемагглютинином (ФГА), конканавалином А
    (КОН-А), аллергенами гемолитического стрептококка, стафилококка. В основе реакции лежит свойство лимфоцитов при сенсибилизации организма к определенным антигенам образовывать стабилизирующие лимфокины, тормозящие миграцию лейкоцитов; чем выше функциональная активность лимфоцитов, тем меньше показатели PTMJI;
  • реакцию бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ), которая оценивает функциональную активность Т-лимфоцитов. В ответ на действие митогенов (ФГА), КОН-А, антилимфоцитарной сыворотки происходит трансформация лимфоцитов в лимфобласты (чем больше образуется бластных клеток, тем выше активность Т-лимфоцитов).

Субпопуляции Т-лимфоцитов определяются с помощью МКАТ.
Для оценки функционального состояния гуморального иммунитета используется количественное определение иммуноглобулинов в плазме крови. Иммуноглобулины (Ig) — это белки, обладающие функцией антител и подразделяющиеся на 5 основных классов: IgG, IgA, IgM, IgD, IgE.
IgG присутствует в сыворотке крови в наиболее высокой концентрации (6,39-13,49 г/л), на его долю приходится 80 % антительной активности. Различают 4 субкласса IgG: IgG, (60-70 %), IgG2 (20-30 %), IgG3 (5-8 %) и IgG4 (1-3 %).
IgA является основным секреторным иммуноглобулином, обнаруживается в слюне, слезах, кишечных и бронхиальных секретах и материнском молоке. В секретах IgA находится в виде димера, содержащего J-цепь и еще один пептид, называющийся секреторным компонентом. Концентрация IgA в норме составляет 0,7-3,12 г/л.
IgM состоит из 5 мономерных субъединиц, связанных дисульфидными мостиками и J-цепью, образующих пентамер. Концентрация IgM в сыворотке крови в норме составляет 0.86-3,52 г/л.
IgD находится в сыворотке в следовых количествах, но является основным типом иммуноглобулинов, присутствующих на мембране В-лимфоцитов.
IgE играет важную роль в реакциях гиперчувствительности немедленного типа.
Для определения концентрации иммуноглобулинов основных классов (IgG, IgM, IgA) используют метод радиальной иммунодиффузии или нефелометриге- скую технику, IgE — высокогувствителъные радиоиммунологигеский или иммуно- ферментный методы.
Определение концентрации иммуноглобулинов используют для диагностики первичных или вторичных иммунодефицитов (в этих случаях наблюдается снижение концентрации иммуноглобулинов основных классов, а также моноклональных иммуноглобулинопатий (в сочетании с иммуноэлектрофорезом сыворотки и мочи).
Наиболее частой формой иммунодефицитов является IgA-иммунодефицит, развитие которого иногда наблюдается при ревматических заболеваниях и может развиваться на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (D-пени- цилламина, сульфасалазина, каптоприла и др.). Увелигение концентрации IgA нередко наблюдается при серонегативных спондилоартропатиях, геморрагическом васкулите, болезни Шегрена, псориатической артропатии.
Часто при воспалительных ревматических заболеваниях наблюдается развитие поликлональной гипериммуноглобулинемии.
Ревматоидные факторы (РФ) являются аутоантителами к Fc-фрагменту IgG, хотя они могут быть связаны и с IgM и IgA. Возможно блокирование ревматоид
ного фактора аутологичным IgG, что ведет к увеличению процента скрытых, комплектованных РФ (при длительном течении ревматоидного артрита с вис- церитами).
Для выявления РФ класса М применяются:
  • реакция латекс-агглютинации с инертными частицами латекса, покрытыми человеческим Ig. Наибольшее разведение сыворотки, дающее агглютинацию, считается титром реакции. Титр 1 : 20 и выше расценивается как положительный;
  • реакция Ваалера-Розе с бараньими эритроцитами, сенсибилизированными кроличьими антителами против эритроцитов барана. Наибольшее разведение сыворотки, дающее агглютинацию, диагностически значимо, если составляет не менее 1 : 32.

Волганогные клетки (LE-клетки). Наличие LE-клеток обусловлено присутствием в сыворотках антител класса IgG к ДНК-гистоновому комплексу, которые реагируют с ядрами, высвобождающимися из различных клеток в результате разрушения этих клеток. LE-клетки обнаруживаются в 60-70 % случаев у больных СКВ. Они представляют собой зрелые нейтрофилы, фагоцитировавшие ядерную субстанцию разрушенных клеток. В цитоплазме нейтрофилов обнаруживаются крупные гомогенные включения (гематоксилиновые тельца). В случаях незавершенного фагоцитоза нейтрофилы скапливаются вокруг гематоксили- нового тельца в форме розетки (феномен розеткообразования). Результат выявления не менее 5 LE-клеток на 1000 лейкоцитов считается положительным. В единичном количестве LE-клетки обнаруживаются у 10 % больных РА, при хроническом активном гепатите, лекарственной аллергии, узелковом полиартериите, ССД, ДМ, СЗСТ.
Антинуклеарные антитела (АНА) наиболее часто определяются при ревматических заболеваниях и встречаются более чем у 90 % больных СЗСТ. Они представляют собой семейство аутоантител, взаимодействующих с рибонуклеиновыми кислотами и белками ядра, цитоплазматическими антигенами. Определяются АНА методом непрямой иммунофлюоресценции, двойной иммунодиффузии и контрэлектрофореза, иммуноферментным методом и методом иммуноблоттинга. При использовании метода непрямой иммунофлюоресценции в практической работе выделяют шесть типов окрашивания или типов свечения ядра, которые важны для диагностики системных заболеваний соединительной ткани:
  • гомогенное окрашивание, связанное с наличием антител к двуспиральной ДНК и гистонам, наиболее характерно для СКВ и лекарственной волчанки;
  • периферигеское окрашивание, вызванное циркуляцией антител к ядерной мембране (специфично для СКВ);
  • гранулярное окрашивание встречается наиболее часто, указывает на наличие различных АНА, поэтому обладает наименьшей специфичностью (при СКВ, РА с висцеральными проявлениями, смешанном заболевании соединительной ткани);
  • нуклеолярное (ядрышковое) свегение обусловлено антителообразованием к компонентам ядрышка, встречается при ССД, болезни Шегрена. Изредка АНФ обнаруживаются при эндокринных заболеваниях (полиэндокринопатия, сахарный диабет I типа, тиреоидит, тиреотоксикоз), кожных заболеваниях (псориаз, пузырчатка), а также на фоне беременности, после трансплантации органов и тканей (при развитии реакции «трансплантат против хозяина»), у больных, находящихся на программном гемодиализе;
  • центромерное свегение отмечается при появлении антител к центромерам хромосом (характерно для хронического течения ССД);
  • цитоплазматигеское свегение указывает на наличие антител к тРНК-син- тетазам, в частности Jo-1 (встречается при ДМ/ПМ).

Методами радиоактивного и иммунного связывания, радиальной иммунодиффузии, иммунопреципитации выявляются АНА к отдельным ядерным антигенам.
Антитела к дезоксирибонуклеиновой кислоте (ДНК). Антитела к нативной (двуспиральной) ДНК, особенно те из них, которые выявляются с помощью ра- диоиммунного теста (метод Фарра), относительно специфичны для СКВ. Их определение имеет существенное значение для оценки активности болезни, прогнозирования развития обострений и эффективности проводимой терапии. Антитела к денатурированной (односпиральной) ДНК менее специфичны для СКВ и часто выявляются при других ревматических заболеваниях.
Антитела к гистонам. Гистоны — это компоненты ядра, состоящие из трех субъединиц: двух димеров Н2А-Н2В. которые фланкированы тетрамером НЗ—Н4 и ассоциированы с третьей субъединицей, состоящей из 2 витков молекулы ДНК. Антитела к гистонам Н2А-Н2В обнаруживаются почти у всех больных с медикаментозным волчаночноподобным синдромом (индуцированным новокаинамидом), у больных, получающих новокаинамид, но не имеющих симптомов волчанки, а также у 20 % больных СКВ.
Антитела к рибонуклеопротеинам (РНП). Антитела к рибонуклеопротеинам, включающие анти-Sm, анти-SmRNP (U1RNP), анти-Ro/SS-A, анти-La/SS-B, суммарно встречаются при СКВ чаще, чем антитела к двуспиральной ДНК. Концентрация этих антител в крови необычайно высока. Обнаруживаются при смешанном заболевании соединительной ткани, реже — у больных СКВ, у которых ведущим клиническим проявлением является поражение кожи, подостром течении ССД и других аутоиммунных ревматических заболеваниях.
Антитела к Srn-антигену. Антитела к Sm-антигену обнаруживаются только при СКВ; при этом в случае использования иммунофлюоресцентного метода — в 30 % случаев, а по данным метода гемагглютинации — в 20 %. Антитела к Sm-антигену не выявляются при других ревматических заболеваниях. Антитела к Sm-антигену рассматриваются как антитела-маркеры СКВ, их выявление входит в число диагностических критериев этого заболевания. При наличии Sm-антител наблюдается более злокачественное течение заболевания, поражение центральной нервной системы, волчаночные психозы и относительная сохранность функции почек. Однако уровень антител к Sm-антигену не коррелирует с активностью и клиническими субтипами СКВ.
Антитела к Ro(Robert)/SS-A направлены против ядерных рибонуклеопротеи- нов, с которыми связаны Y1-Y5 цитоплазматические РНК, транскрибируемые РНК-полимеразой III. В зависимости от чувствительности используемых методов исследования антитела к Ro/SS-A обнаруживаются у 60-78 % больных с синдромом Шегрена, у 96 % больных болезнью Шегрена и у 35-57 % больных СКВ.
При СКВ продукция данных антител ассоциируется с определенным набором клинических проявлений и лабораторных нарушений: фотосенсибилизацией, синдромом Шегрена, поражением легких, лимфопенией, тромбоцитопенией и гиперпродукцией РФ. Повышение концентрации антител к Ro/SS-A в сочетании с гиперпродукцией IgM РФ часто наблюдается при АНФ-отрицательном подтипе заболевания (у 2-5 % больных СКВ) — так называемой подострой кожной волчанке.

Антитела к La(Lane)/SS-B направлены против белков, связанных с транскриптами РНК полимеразы-3. Антитела к La/SS-B в большинстве случаев наблюдаются совместно с антителами к Ro/SS-A, в то время как последние могут встречаться изолированно. Антитела к La/SS-B обнаруживаются при болезни и синдроме Шегрена, сочетающемся с РА и СКВ (но не с системной склеродермией), и при первичном билиарном циррозе печени. При СКВ антитела к SS-B/La-антигену чаще встречаются в начале болезни, развивающейся в пожилом возрасте, и ассоциируются с низкой частотой развития нефрита.
Антитела Scl-70 чаще выявляются при диффузной форме ССД. При данном заболевании присутствие антител Scl-70 в сочетании с носительством генов HLA-DR3/DRW52 в 17 раз увеличивает риск развития легочного фиброза. Обнаружение антител Scl-70 у больных с изолированным феноменом Рейно указывает на высокую вероятность развития ССД.
Антицентромерные антитела (АсА) обнаруживаются у 20 % больных ССД (у большинства из них имеются признаки CREST-синдрома), реже — при первичном билиарном циррозе печени (у половины этих больных имеются признаки склеродермии) и очень редко — при хроническом активном гепатите и первичной легочной гипертензии. Антитела к центромере рассматриваются как прогностически неблагоприятный показатель развития ССД у больных с синдромом Рейно.
Антитела к аминоацилсинтетазе тРНК (антисинтетазные антитела) обнаруживаются при наличии у больных ПМ интерстициального поражения легких. В целом антитела к синтетазам выявляются у 40 % больных с ПМ, у 54 % больных с ДМ в случае идиопатической формы этих заболеваний и только у 6 % больных ПМ. Антитела к синтетазам обнаруживаются и при других ДБСТ, кроме опухолевого миозита. Продукция антисинтетазных антител ассоциируется с развитием так называемого «антисинтетазного синдрома».
Антифилаггриновые антитела (АФА) представляют семейство, в которое входят антикератиновые антитела, антиперинуклеарный фактор, антитела к Sa-антигену и недавно описанные антитела к циклическому цитруллинсодержа- щему пептиду. По современным представлениям, главной антигенной детерминантой, распознаваемой этими антителами, являются цитруллинированные пептиды, которые, в частности, присутствуют в синовиальной оболочке больных РА. АФА являются высокоспецифическими для РА. Наибольшее применение АФА находят в диагностике раннего РА. В ряде работ показано более агрессивное течение заболевания у больных РА при наличии этих антител.
Антитела к фосфолипидам (АФЛ) — гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с отрицательно заряженными (фосфатидилсерин, фосфатидилинози- тол, кардиолипин) и нейтральными (фосфатидилэтаноламин, фосфатидилхо- лин) фосфолипидами. К ним относятся волчаночный антикоагулянт, антитела к кардиолипину и факторы, которые определяют развитие ложноположительной реакции Вассермана.
Волганогный антикоагулянт (ВА) — иммуноглобулины классов IgG и/или IgM, подавляющие in vitro одну или несколько фосфолипидзависимых коагуляционных реакций. ВА рассматривают как представителя семейства антител к фосфолипидам, их синтез ассоциируется с развитием венозных или артериальных тромбозов.

Антитела к кардиолипину (АО). Для определения AKJI используют имму- ноферментный метод. Продукция AKJI (особенно при высоких титрах AKJI класса IgG), так же как и образование В А, ассоциируется с развитием антифос- фолипидного синдрома.
Ложноположительная реакция Вассермана является быстрым серологическим методом диагностики сифилиса, основанным на флоккуляции стандартной суспензии фосфолипидов (кардиолипин) сывороткой больного, содержащей ан- титрепонемные антитела (реагин). Для более точной диагностики сифилиса используют метод иммунофлюоресценции с трепонемным антигеном.
У 15-20 % больных СКВ выявляется ложноположительная реакция Вассермана, а у 30 % здоровых лиц с ложноположительной реакцией Вассермана в последующем развивается СКВ. Особенно часто ложноположительная реакция Вассермана обнаруживается у больных с антифосфолипидным синдромом.
Антинейтрофильные цитоплазматигеские антитела (АНЦА). АНЦА относятся к семейству аутоантител, направленных против специфических антигенов, которые присутствуют в цитоплазме нейтрофилов. Существуют два типа АНЦА, которые определяют с помощью метода непрямой иммунофлюоресценции при использовании фиксированных абсолютным спиртом нейтрофилов доноров. Антитела к протеиназе-3 вызывают диффузное (классическое) цитоплазматическое свечение и обозначаются как к-АНЦА или ц-АНЦА. Антитела к миелопе- роксидазе, эластазе и лактоферрину характеризуются перинуклеарным типом свечения и обозначаются как перинуклеарные или п-АНЦА. АНЦА часто выявляются при системных васкулитах.
Стрептококковая инфекция вызывает увеличение титров антистрептококковых антител. Определение антистрептококковых антител используют для диагностики острой ревматической лихорадки и острого гломерулонефрита. Наибольшее распространение получило определение антител к стрептолизину-0 (ACJI-0), стрепто- киназе (АСК) и стрептодезоксирибонуклеазе В (анти-ДНКаза В). Увеличение титров ACJI-0 обнаруживается более чем у 2/3 больных острой ревматической лихорадкой и только у половины больных острым гломерулонефритом. Максимальные титры антистрептококковых антител выявляются в период развития полиартрита, а во время развития кардита или хореи титры этих антител значительно уменьшаются, что снижает диагностическую ценность данного теста.
Большое значение для диагностики имеют реакции определения антител после перенесенных инфекций (реакция Вассермана, реакции связывания комплемента с туберкулезным, псевдотуберкулезным, иерсиниозным, шигеллезным и другими антигенами, HBs-антигенами, гонококковым (реакция Борде - Жангу) и бруцеллезным (реакция Райта — Хеддльсона) антигенами, титр антихлами- дийных антител).
Криоглобулины — группа сывороточных белков, обладающих аномальной способностью к обратимой преципитации или образованию геля при низкой температуре. Криоглобулины могут обнаруживаться при различных заболеваниях внутренних органов, в том числе весьма часто при системных ревматических болезнях.
В зависимости от состава криоглобулины разделяют на три основных типа. Тип I состоит из моноклональных иммуноглобулинов IgA или IgM, реже — моноклональных легких цепей (белок Бенс-Джонса). Тип II (наблюдается при так называемой смешанной криоглобулинемии) состоит из моноклональных имму
ноглобулинов (обычно IgM, реже IgA или IgG), обладающих антиглобулиновой активностью против поликлонального IgG. Тип III (наблюдается при так называемой смешанной криоглобулинемии) состоит из одного или нескольких классов поликлональных иммуноглобулинов. Самой частой формой криоглобулинемии при ревматических заболеваниях является тип III. Он встречается при СКВ, РА, ССД, синдроме Шегрена.
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК). Увеличение концентрации ЦИК отражает воспалительную и иммунологическую активность патологического процесса при СКВ, РА, серонегативных спондилоартропатиях.
Исследование синовиальной жидкости (СЖ). Нормальная СЖ стерильная, светло-желтая, прозрачная и вязкая, цитоз не превышает 0,18 х 109/л. Клеточный состав СЖ представлен клетками покровного слоя синовиальной оболочки и лейкоцитами, при этом в норме преобладают моноциты и лимфоциты (до 75 %), количество полиморфно-ядерных нейтрофилов колеблется от 0 до 25 %, а синовиоцитов — от 0 до 12 %.
Колигество СЖ в норме 0,2-2 мл, при суставных заболеваниях 3-25 мл и более.
Цвет СЖ в норме светло-желтый; при дегенеративно-дистрофических заболеваниях — светло-желтый, желтый, соломенный; при воспалительных заболеваниях — от светло-желтого до бурого, лимонный, янтарный, серый, розоватый.
Прозрагность. Различают четыре степени прозрачности СЖ: прозрачная, полупрозрачная, умеренно мутная, интенсивно мутная. В норме СЖ прозрачная, при невоспалительных заболеваниях суставов — прозрачная, полупрозрачная, при воспалительных — умеренно или интенсивно мутная.
Осадок. В норме осадка нет; при воспалительных заболеваниях суставов осадок обнаруживается практически всегда. Как правило, это обрывки клеточных мембран, фибриновых нитей, коллагеновых волокон, обломки хряща и синовиальной оболочки, образующиеся в процессе деструкции, в ряде случаев также кристаллы.
Плотность муцинового сгустка. В норме муциновый сгусток плотный, при невоспалительных заболеваниях суставов — умеренно плотный, при воспалительных — рыхлый или умеренно рыхлый.
Вязкость. Вязкость СЖ определяют различными способами. В рутинных исследованиях вязкость СЖ принято определять по длине муциновой нити. Различают три степени вязкости: низкая — до 1 см, средняя — до 5 см и высокая — свыше 5 см. В норме вязкость СЖ высокая, при невоспалительных заболеваниях суставов — средняя, при воспалительных — низкая. Существуют также инструментальные методы оценки вязкости СЖ с применением визкозиметров.
Цитоз. В пробирки, содержащие 0,4 мл изотонического раствора натрия хлорида, добавляют по 0,02 мл СЖ. Подсчет общего числа клеток производят в счетной камере. При невоспалительных заболеваниях суставов общее число клеток не превышает 3 х 109/л, при воспалительных — колеблется от 3 до 50 х 109/л. В септической СЖ цитоз превышает 50 х 109/л.
Синовиоцитограмма. При невоспалительных заболеваниях суставов в СЖ преобладают лимфоциты (до 80 %), при воспалительных заболеваниях полиморфно-ядерные нейтрофилы (до 90 %).
Рагоциты. В нормальной СЖ рагоцитов нет. При невоспалительных заболеваниях суставов и серонегативных спондилоартритах количество рагоцитов со
ставляет от 2 до 15 % от общего числа клеток. При РА количество рагоцитов достигает 40 % и более в зависимости от степени местной воспалительной активности.
Кристаллы. Кристаллы в СЖ идентифицируют при помощи поляризационного микроскопа. Довольно надежно идентифицируются кристаллы уратов и гшрофосфата кальция, имеющие противоположные оптические свойства. Кристаллы гидроксиапатита в связи с небольшими размерами могут быть выявлены только при электронной микроскопии.
Общий белок. В норме содержание белка в СЖ составляет 15-20 г/л, при невоспалительных заболеваниях суставов — 22-37 г/л, при воспалительных — 35-48 г/л, при РА — до 60 г/л.
Глюкоза. В норме содержание глюкозы составляет 3,5-5,5 ммоль/л, при невоспалительных заболеваниях суставов — 4,5-5,5 ммоль/л, при воспалительных — 2,0-5,5 ммоль/л. При септических артритах глюкоза в СЖ практически не обнаруживается.
Ревматоидный фактор, С-реактивный белок. В нормальной СЖ ревматоидный фактор не обнаруживается, при невоспалительных заболеваниях суставов может определяться в небольшом титре — 1: 20—1: 40; при серопозитивном РА титр ревматоидного фактора в СЖ существенно превышает 1 : 40. Уровень СРВ в СЖ при невоспалительных заболеваниях суставов составляет 0,001 г/л, при воспалительных — от 0,01 до 0,06 г/л и выше. 


А так же в разделе «  МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ»

Источник: http://www.med24info.com/books/bolezni-sustavov-rukovodstvo-dlya-vrachey/metod-laboratornoy-diagnostiki-3842.html

Методы лабораторной диагностики. Иммунологические методы

  • Методы исследования опорно-двигательного аппарата

    Следует помнить, что нередко заболевания внутренних органов приводят к появлению артралгий (хронический холецистит, хронический гепатит, нейроциркуляторная дистония и др.), с другой стороны, при многих заболеваниях суставов (ревматоидный артрит, болезнь Рейтера, анкилозирующий спондилоар...

    Диагностика в ревматологии
  • Методы лабораторной диагностики. Иммунологические методы

    Иммунологические методы исследования имеют важное диагностическое и прогностическое значение при многих ревматических заболеваниях. Изучение неспецифического иммунитета включает в себя исследование количества лейкоцитов и моноцитов в сыворотке крови, компонентов комплемента, оценку подвижности, фаго...

    Диагностика в ревматологии
  • Лабораторные исследования при ревматических заболеваниях. С-реактивный белок (СРВ)

    Выявление повышенного содержания СРВ в сыворотке крови относится к чувствительным методам диагностики некоторых острых и хронических заболеваний. У здоровых количество СРВ не должно превышать уровень 0,005 г/л. При многих ревматических заболеваниях его уровень возрастает, нередко очень значительно.

    Диагностика в ревматологии
  • Источник: http://medbe.ru/materials/diagnostika-v-revmatologii/metody-laboratornoy-diagnostiki-immunologicheskie-metody/

    Лабораторная диагностика - это уникальный способ исследования. Методы и особенности

    Большое количество существующих заболеваний, индивидуальная степень проявления симптомов у разных людей осложняют процесс диагностики. Нередко на практике недостаточно применения одних только знаний и умений врача. В этом случае поставить верный диагноз помогает клиническая лабораторная диагностика. С её помощью на ранней стадии выявляются патологии, осуществляется мониторинг развития заболевания, производится оценка его возможного течения и определяется эффективность назначенного лечения. На сегодняшний день медицинская лабораторная диагностика – одна из самых стремительно развивающихся сфер медицины.

    Понятие

    Лабораторная диагностика – это медицинская дисциплина, применяющая на практике стандартные диагностические способы для выявления и мониторинга заболеваний, а также занимающаяся поиском и изучением новых методов.

    Клиническая лабораторная диагностика значительно облегчает постановку диагноза и позволяет выбрать наиболее эффективную схему терапии.

    Подотраслями лабораторной диагностики являются:

    • клиническая биохимия;
    • клиническая гематология;
    • иммунология;
    • вирусология;
    • клиническая серология;
    • микробиология;
    • токсикология;
    • цитология;
    • бактериология;
    • паразитология;
    • микология;
    • коагулология;
    • лабораторная генетика;
    • общеклинические исследования.

    Информация, полученная при помощи различных методов клинической лабораторной диагностики, отражает течение заболевания на органном, клеточном и молекулярном уровнях. За счёт этого врач имеет возможность своевременно диагностировать патологию или оценить результат после проведённого лечения.

    Задачи

    Лабораторная диагностика призвана решать следующие задачи:

    • непрерывный поиск и изучение новых методов анализа биоматериала;
    • анализ функционирования всех органов и систем человека с помощью существующих методов;
    • обнаружение патологического процесса на всех его стадиях;
    • контроль за развитием патологии;
    • оценка результата терапии;
    • точное определение диагноза.

    Главной же функцией клинической лаборатории является предоставление врачу сведений о анализе биоматериала, сравнение полученных результатов с нормальными показателями.

    На сегодняшний день 80% всей информации, важной для постановки диагноза и контроля за лечением, предоставляет клиническая лаборатория.

    Виды исследуемого материала

    Лабораторная диагностика – это способ получения достоверной информации путём исследования одного или нескольких видов биологического материала человека:

    • Венозная кровь – берётся для гематологического анализа из крупной вены (преимущественно на сгибе локтя).
    • Артериальная кровь – чаще всего берётся для оценки КОС (кислотно-основного состояния) из крупных вен (преимущественно из бедра или области под ключицей).
    • Капиллярная кровь – берётся для множества исследований из пальца.
    • Плазма – её получают центрифугированием крови (т.е. разделением её на составляющие).
    • Сыворотка – плазма крови после отделения фибриногена (компонента, являющегося показателем свёртываемости крови).
    • Утренняя моча – собирается сразу после пробуждения, предназначена для общего анализа.
    • Суточный диурез – моча, которая собирается в одну ёмкость в течение суток.

    Этапы

    Лабораторная диагностика включает следующие этапы:

    • преаналитический;
    • аналитический;
    • постаналитический.

    Преаналитический этап подразумевает:

    • Соблюдение человеком необходимых правил подготовки к анализу.
    • Документальную регистрацию пациента при явке в медицинское учреждение.
    • Подпись пробирок и иных ёмкостей (например, с мочой) в присутствии пациента. На них рукой медицинского работника наносятся ФИО и вид анализа – эти данные он обязан произнести вслух для подтверждения их достоверности пациентом.
    • Последующую обработку взятого биоматериала.
    • Хранение.
    • Транспортировку.

    Аналитический этап – это процесс непосредственного исследования полученного биологического материала в лаборатории.

    Постаналитический этап включает:

    • Документальную регистрацию результатов.
    • Интерпретацию результатов.
    • Формирование отчета, содержащего: данные пациента, лица, проводившего исследование, медицинского учреждения, лаборатории, дату и время забора биоматериала, нормальные клинические пределы, результаты с соответствующими выводами и комментариями.

    Методы

    Основными методами лабораторной диагностики являются физико-химические. Их суть состоит в исследовании взятого материала на предмет взаимосвязи его различных свойств.

    Физико-химические методы подразделяются на:

    • оптические;
    • электрохимические;
    • хроматографические;
    • кинетические.

    Наиболее часто в клинической практике применяется оптический метод. Он заключается в фиксировании изменений луча света, проходящего через подготовленный к исследованию биоматериал.

    На втором месте по числу проведённых анализов находится хроматографический способ.

    Вероятность ошибок

    Важно понимать, что клиническая лабораторная диагностика – это вид исследования, в процессе которого могут быть допущены ошибки.

    Каждая лаборатория должна быть оснащена качественными инструментами, анализы должны выполняться высококвалифицированными специалистами.

    По статистике, основная доля ошибок приходится на преаналитический этап – 50-75%, на аналитический – 13-23%, на постаналитический – 9-30%. Регулярно должны проводиться мероприятия, направленные на снижение вероятности появления ошибок на каждом этапе лабораторного исследования.

    Клиническая лабораторная диагностика – это один из самых информативных и достоверных способов получения сведений о состоянии здоровья организма. С её помощью возможно выявить любые патологии на раннем этапе и своевременно предпринять меры по их устранению.


    До ужаса красивы:15 шокирующих пластических операций, завершившихся плачевно

    Пластическая хирургия среди звезд остается невероятно популярной и по сей день. Но проблема в том, что раньше результат не всегда оказывался идеальным...

    Пластическая хирургия

    10 потрясающих женщин, родившихся мужчинами

    В наше время все больше и больше людей меняют пол, чтобы соответствовать своей природе и чувствовать себя естественно. Более того, есть еще андрогинны...

    Женские вопросы

    10 очаровательных звездных детей, которые сегодня выглядят совсем иначе

    Время летит, и однажды маленькие знаменитости становятся взрослыми личностями, которых уже не узнать. Миловидные мальчишки и девчонки превращаются в с...

    Знаменитости

    13 признаков, что у вас самый лучший муж

    Мужья – это воистину великие люди. Как жаль, что хорошие супруги не растут на деревьях. Если ваша вторая половинка делает эти 13 вещей, то вы можете с...

    Брак

    6 признаков, что у вас было много прошлых жизней

    Вы когда-нибудь чувствовали, что у вас «старая» душа? Может быть, вы именно тот человек, который многократно перерождался? Эти 6 убедительных признако...

    Мистика

    Как выглядеть моложе: лучшие стрижки для тех, кому за 30, 40, 50, 60

    Девушки в 20 лет не волнуются о форме и длине прически. Кажется, молодость создана для экспериментов над внешностью и дерзких локонов. Однако уже посл...

    Волосы

    Похожие статьи

    Источник: http://fb.ru/article/329820/laboratornaya-diagnostika---eto-unikalnyiy-sposob-issledovaniya-metodyi-i-osobennosti
    Возможно вас заинтересует